本发明属于分子生物学领域，具体涉及粉棒束孢的Defensin基因、基因和重组蛋白的制备方法、重组蛋白及应用。本发明从一株具有较强杀虫活力的粉棒束孢FTRSY‑2菌株出发，首次从粉棒束孢基因组中克隆出粉棒束孢Defensin基因，命名为Ifdef，以该基因为出发点，通过分子生物学的手段构建重组载体、工程菌、重组Defensin蛋白等，并对其进行了功能验证。本发明得到的重组Defensin蛋白性质稳定，产量和纯度较高，并具有广谱杀菌效力和药理活性，有潜力开发成为生防制剂、抗菌药品、抗肿瘤药品、保健产品等。