本发明涉及兽用生物制品技术领域,具体公开了一株I群4型禽腺病毒毒株及其应用。所述I群4型禽腺病毒毒株ZMXZAV‑4株,保藏编号为CGMCC No.14296。其具有细胞适应性强,产毒量高,免疫原性强等特点。以此毒株为基础发明的鸡新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽腺病毒三联灭活疫苗,其中鸡新城疫病毒为La Sota毒株;传染性法氏囊病病毒为LY23株,保藏编号为CGMCC No.11594;禽腺病毒为I群4型禽腺病毒ZMXZAV‑4株,保藏编号为CGMCC No.14296。该疫苗安全、有效,可用于预防鸡新城疫、传染性法氏囊病、禽腺病毒病,达到一针防三病的效果,减少免疫成本和免疫应激反应。